小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。
目前常用的分離方法有全骨髓法和密度梯度離心法,全骨髓法即根據(jù)干細(xì)胞貼壁特性,定期換液除去不貼壁細(xì)胞,從而達(dá)到純化MSC的目的;密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中細(xì)胞成分比重的不同,提取單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)。
隨著對表面抗原認(rèn)識的深入,有人利用免疫方法如流式細(xì)胞儀法、免疫磁珠法等對其進(jìn)行分離純化,但經(jīng)過流式或磁珠分選后的細(xì)胞出現(xiàn)了增殖緩慢等一些問題,加之耗費(fèi)較大和技術(shù)的難度,在某種程度上限制了這些方法的廣泛應(yīng)用。
培養(yǎng)的意義
1.有利于進(jìn)行骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性的研究。
2.為下一步的傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。
3.可以直接應(yīng)用與臨床實(shí)踐,是研究小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作用的前提。
此法的優(yōu)點(diǎn)是:
?、俜蛛x效果好,可一次獲得較純顆粒;
?、谶m應(yīng)范圍廣,能像差速離心法一樣分離具有沉降系數(shù)差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;
?、垲w粒不會(huì)擠壓變形,能保持顆?;钚?,并防止已形成的區(qū)帶由于對流而引起混合。