小鼠肝細(xì)胞通常指小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。在動(dòng)物體正常生理和病理?xiàng)l件下，肝臟在能量代謝、外源物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化、基質(zhì)蛋白的合成、解毒等方面發(fā)揮著其重要的作用。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的基本組成單位，大約占肝臟體積及數(shù)量的80%左右，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞具有多方面的功能，例如：蛋白質(zhì)的合成和儲(chǔ)存、分泌膽汁和解毒物質(zhì)等。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞體外常常被用作研究肝臟功能、能量代謝和肝臟疾病的良好模型
小鼠肝細(xì)胞試驗(yàn)方法：
1.將小鼠斷頸致死，置75%酒精泡2-3秒鐘，取肝臟，置于盛有PBS的平皿中。
2.剔除脂肪、結(jié)締組織、血液等雜物，轉(zhuǎn)移到另一個(gè)盛有PBS液的平皿中。
2.3用手術(shù)剪將臟器剪成小塊(大小約1mm2)，玻片研磨，轉(zhuǎn)到離心管，離心(1000rpm，5min)。
4.視組織或細(xì)胞量加入5-6倍(3-5ml)胰酶，37℃中消化20分鐘，每隔5分鐘振蕩一次，或用吸管吹打一次，使細(xì)胞分離。
5.加入3-5ml含血清的培養(yǎng)液以中止胰酶消化作用。
6.用100目孔徑濾網(wǎng)濾過，除去未消化的大組織塊。
7.再次離心5min，棄上清液。
8.加入無血清培養(yǎng)液5ml，沖散細(xì)胞，再離心一次，棄上清液。
9.加入含血清的培養(yǎng)液1-2ml(視細(xì)胞量)，血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
10.將細(xì)胞調(diào)整到5×105/ml左右，轉(zhuǎn)移至6孔培養(yǎng)板中，37℃下培養(yǎng)。
更新時(shí)間：2022-05-20
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