技術(shù)文章
Technical articles癌細(xì)胞株(Cell Strain)是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
原代培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱(chēng)為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。 所以細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來(lái)講,可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對(duì)于人類(lèi)肝癌細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱(chēng)為連續(xù)性株或系。
1. 取材于原發(fā)肝癌組織,建系過(guò)程中沒(méi)有改變其生物學(xué)特性 早期所建的細(xì)胞系都屬于此類(lèi),它們有一些共同點(diǎn),如AFP均為陽(yáng)性,能分泌一些血漿蛋白,但也存在一些明顯的差別,PLC/PRF/5和HepG2在裸鼠中成瘤性都較差,而QGY-7703和SMMC-7721異移植成功率為100%,PLC/PRF/5能檢測(cè)到HBsAg,HepG2則不含HBV。
2 肝癌細(xì)胞株有哪些還包括具有特征性的人肝癌細(xì)胞系是MHCC97是利用裸鼠人肝癌高轉(zhuǎn)移模型在體外建立7a686964616fe4b893e5b19e31333337373663的 ,該細(xì)胞系HBsAg、HBxAg、AFP均陽(yáng)性,經(jīng)皮下和肝內(nèi)接種均可使棵鼠致瘤,并發(fā)生肺部轉(zhuǎn)移,肝內(nèi)接種者,肺轉(zhuǎn)移達(dá)100%(12/12),肺轉(zhuǎn)移灶癌細(xì)胞AFP陽(yáng)性。從該細(xì)胞系克隆出的兩株細(xì)胞 的生物學(xué)特性有明顯差別,高轉(zhuǎn)移株肺轉(zhuǎn)移率為100%,而低轉(zhuǎn)移株僅為40%。 一株外生型肝癌細(xì)胞系EGHC-9901,該細(xì)胞系能持續(xù)高分泌AFP,能形成完整毛細(xì)膽管且有明顯微絨毛,說(shuō)明細(xì)胞變異較小。一些人肝癌細(xì)胞系其宿主患有其他腫瘤或疾病。KMCH-1是一株肝癌和膽管癌混合的細(xì)胞系,該細(xì)胞系在無(wú)胸腺鼠中能成瘤,但形成瘤體的分化程度卻不同,皮下移植瘤呈低分化,而腹腔內(nèi)腫瘤分化良好。RBHF-1 遺傳性血色素沉積病的肝癌患者,HBV和HCV均陰性,該細(xì)胞系的建立有助于鐵沉積過(guò)多的研究。Mz-Hep-1 是一株致癌物相關(guān)的肝癌來(lái)源的細(xì)胞系,該細(xì)胞系的宿主長(zhǎng)期暴露在高濃度的二氧化釷環(huán)境中,沒(méi)有肝炎病毒感染。
3 人為轉(zhuǎn)染了病毒和(或)基因的細(xì)胞系 隨著隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們根據(jù)預(yù)設(shè)目的改造原有的細(xì)胞系,從而建立有既定生物學(xué)特性的肝癌細(xì)胞系。HB611 是一株轉(zhuǎn)染了含HBV基因的重組DNA分子和一種抗新霉素基因的Huh6-c15的肝癌細(xì)胞系克隆,能聚集核心顆粒并高水平產(chǎn)生和釋放HBsAg和HBeAg。有人將病人的HCV轉(zhuǎn)染到SMMC-7721細(xì)胞中,在至少3個(gè)多月的時(shí)間里都能在細(xì)胞內(nèi)檢測(cè)到HCV RNA和HCVNS3,CP10抗原的表達(dá)。