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大鼠肝S9含有豐富的藥物代謝酶

更新時間:2020-03-19點擊次數(shù):2260
   大鼠肝S9是大鼠肝實質(zhì)細胞勻漿液的去線粒體上清液,包含了大量的CYPs等藥物代謝酶,其在藥物體外代謝的研究中具有快速簡便、靈敏、經(jīng)濟且可進行高通量篩選的特點,因此常用作體外研究藥物代謝和藥物相互作用的工具。
   許多致癌劑的生物轉(zhuǎn)化是依靠細胞內(nèi)微粒體混合功能氧化酶系來完成的,所以肝S9是許多體外研究致癌劑生物轉(zhuǎn)化的活化系統(tǒng)。傳統(tǒng)的肝S9誘導(dǎo)劑為多氯聯(lián)苯,其誘導(dǎo)效果比單獨用β-奈黃酮要好,但其是致癌劑,一種嚴重的環(huán)境污染物,現(xiàn)許多國家已禁止生產(chǎn)。現(xiàn)研究表明聯(lián)合誘導(dǎo)法可以達到多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的效果,通過優(yōu)化β-奈黃酮聯(lián)合誘導(dǎo)法以及肝S9制備方法可以獲得高產(chǎn)量的大鼠肝S9以及較高的P450酶含量。
   來源于肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的亞細胞組分,含有豐富的藥物代謝酶,是有價值的研究藥物代謝和藥物相互作用的工具,主要用于評價藥物或候選化合物代謝穩(wěn)定性。大鼠肝S9采用螺旋涂布法和試驗方法對市售和自制兩種來源S9活化的陽性結(jié)果進行比較,并加入甘油保護劑,建立S9酶系統(tǒng)低溫儲存方法,使其以液態(tài)保存于-20℃冰箱中。
   肝S9是肝組織勻漿經(jīng)過9000g離心后的上清部分,簡稱為S9。S9是完整肝細胞去除細胞核、線粒體及大的碎片之后的部分,原則上保留了定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的微粒體蛋白,溶解在細胞漿液中的蛋白,以及各種細胞內(nèi)容物質(zhì),如NADPH、UDPGA、PAPS等啟動藥物代謝反應(yīng)的輔助因子。S9可以擴展微粒體研究的范圍,但是引起所含有的輔助因子(也稱輔酶)量少,實驗時還是需要添加這些因子,以便實驗順利開展。    
 
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